固相萃取柱的正確操作使用指南
點(diǎn)擊次數(shù)：40 更新時(shí)間：2026-03-05
固相萃取柱是環(huán)境、食品、制藥及臨床檢測(cè)中用于樣品凈化、富集與基質(zhì)去除的核心前處理工具，通過(guò)吸附劑選擇性保留目標(biāo)物，顯著提升后續(xù)色譜或質(zhì)譜分析的準(zhǔn)確性與靈敏度。若操作不當(dāng)，易因活化不充分、上樣超載、洗脫不當(dāng)或交叉污染，導(dǎo)致回收率偏低、重現(xiàn)性差甚至假陽(yáng)性結(jié)果。
固相萃取柱應(yīng)嚴(yán)格遵循活化到位、上樣精準(zhǔn)、洗脫高效、防污到位四大原則，確保萃得凈、取得準(zhǔn)、測(cè)得真。
一、使用前準(zhǔn)備
選擇合適填料與規(guī)格：
C18適用于非極性化合物（如農(nóng)藥、多環(huán)芳烴）；
SAX/SCX用于離子型物質(zhì)（如生物堿、有機(jī)酸）；
柱容量（如500mg/6mL）需匹配樣品濃度，避免過(guò)載；
溶劑兼容性確認(rèn)：
確保樣品溶劑與活化/洗脫溶劑互溶，防止填料干裂或通道形成。
二、規(guī)范操作四步法
1、活化：
先用3–5mL強(qiáng)洗脫溶劑（如甲醇）潤(rùn)濕填料，再用3–5mL弱溶劑（如水或緩沖液）平衡，使吸附劑處于適宜吸附狀態(tài)；
2、上樣：
樣品以慢速（1–2mL/min）流過(guò)柱床，避免溝流；高鹽或高脂樣品需離心/過(guò)濾預(yù)處理；
3、淋洗：
用中等強(qiáng)度溶劑（如5%甲醇水）去除雜質(zhì)，切勿洗脫目標(biāo)物；
4、洗脫：
用小體積強(qiáng)溶劑（如純甲醇、乙腈）分2–3次洗脫，每次浸泡30秒后重力滴落，禁止抽干柱床（尤其反相柱），以防目標(biāo)物不可逆吸附。
三、關(guān)鍵細(xì)節(jié)控制
全程保持填料濕潤(rùn)：干柱會(huì)導(dǎo)致回收率驟降；
使用正壓裝置時(shí)，控制流速均勻；
高通量實(shí)驗(yàn)建議使用96孔板式SPE，但需校準(zhǔn)每孔流速一致性。
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